YY/T 1286.2-2016.Performance for platelets storage bag-Part 2:Test guide on evaluation for platelet storability.
6血小板低渗休克试验
6.1试验原理
血小板的低渗休克(HSR)表示血小板在低渗环境中体积膨胀后恢复其正常体积的能力。在富血小板血浆(PRP)中加入低渗的磷酸盐缓冲液或蒸馏水，使血小板体积膨胀,经历一段时间后血小板细胞适应低渗环境而体积恢复。采用分光光度计(波长610 nm处)检测血小板体积膨胀时导致的透射光增加，以及血小板体积恢复阶段透射光的减少来评价血小板体外功能。本试验通过检测血小板不同贮存时间的低渗休克,用以评价待检血小板贮存袋对血小板抗低渗休克能力的影响程度。
6.2试验仪器和试剂
6.2.1试验仪器
分光光度计"、血细胞计数仪、尖底试管离心机、可调微量移液器(250μL~1000μL)37C恒温水浴.塑料试管、塑料尖底试管.
6.2.2试剂
蒸馏水.磷酸盐缓冲液(PBS) :pH=7.2~7.4.
6.3样品准备
6.3.1贫血小板血浆
血小板贮存袋保存1d~7d血小板悬液(按照血小板贮存袋的实际使用要求保存适宜剂量的新鲜制备的血小板),分别于保存的第1 d.3 d.5 d.7 d取样。取血小板悬液约10 mL于塑料试管中,以1 600g~1 650g离心10 min,取上清液得贫血小板血浆(PPP)。PPP中血小板浓度低于1X10'/L.
6.3.2富血小板血浆
血小板贮存袋保存1d~7d血小板悬液(按照血小板贮存袋的实际使用要求保存适宜剂量的新鲜采集的血小板),分别于保存的第1 d.3 d,5 d.7 d取样。用血细胞计数仪计数血小板浓度,取2 mL用
6.3.1制备的PPP调节血小板浓度至2X10"/L~4X 10'/L,即得富血小板血浆(PRP)。
6.4试验步骤
6.4.1分光光度计开 机预热30 min,波长调至610 nm.
YY/T 1286.2-2016 血小板贮存袋性能 第2部分:血小板贮存性能评价指南