GB/T 29661-2013.Determination of urea content in cosmetics- Enzymatic method.
6分析步骤
6.1试样制备
6.1.1水剂类、乳液类.膏霜类(O/W)样品
称取均匀样品0.5 g(糖确至0.01 g)于高型绕杯中,加入50 mL水,用塑料酶膜封口,超声提取20 min.
将高型烧杯放在磁力搅拌器上,边搅拌边滴加盐酸(4.2)中和至pH4.0(用pH计,不计量,若溶液呈pH<4.0,则露滴加NaOH溶液(4.3)到pH>4. 0,再用盐酸(4.2)中和至pH4.0),加入0.2 g粉碎较细的尿素酶(4.1)立即用塑料薄膜封口,置于50C水裕中不时的摇晃,30min后取出冷却至室温,边搅拌边用0.1 mol/L的盐酸(4.2)滴定至pH4. 0,记录消耗的0. 1 mo/L盐酸标准溶液的体积V,。同时做一空白试验,记录消耗的0.1 mol/L盐酸标准溶液的体积V..
6.1.2脊霜类(W/O).油溶性样品
称取均匀样品0.5 g(精确至0.01 g)于15 mL离心管中,加10 mL无水乙醇(4.4),超声提取.20 min.以不低于5 000 t/min离心15 min,将上清液全部转移至高型烧杯中,再加入40 mL水,播匀。余下步骤与6.1.1相同。
6.1.3屏膏类样品
称取均匀样品0.5g(精确至0.01 g)于15 mL离心管中,加10 mL无水乙醇(4.4),在80 C水浴中加热3 min~5 min使唇膏融化,涡旋1 min,超声提取20 min.以不低于5 000 r/min离心15 min,将上清液全部转移至高型烧杯中,再加入40 mL水,摇匀。余下步骤与6.1.1相同。
6.2平 行试验
按上述步骤,对同一样品进行平行实验测定.
结果计算
按式(1)计算尿素含量,以%表示:
GB/T 29661-2013 化妆品中尿素含量的测定酶催化法