SN/T 3687-2013.Detection and identification of peach X phytoplasma.
1范围
SN/T 3687规定了植物检疫中桃X病(Peach X disease)的现场检疫和分子生物学鉴定方法。
SN/T 3687适用于进出境桃、油桃、樱桃、李树等种苗中桃X病植原体的检疫鉴定。
2桃X病植原体基本信息
英文名:Peach X phytoplasma
分类地位:细菌界(Bacteria),软壁菌门(Tenericutes),柔膜菌纲(Mollicutes)(又称软球菌纲),非固醇菌原体目(Acholeplasmatales),非固醇菌原体科( Acholeplasmataceae),植原体属( phytoplasma), 16SrIII植原体组。该植原体的地理分布、寄主范围和症状、传播途径及基因组特征等参见附录A。
3方法原理
DAPI染色后的形态学观察为初步筛查方法;以植原体核糖体16SrDNA通用引物进行PCR扩增、测序及限制性内切酶指纹图谱为主要的判定依据。
4主要仪器设备和用具
4.1 仪器设备
PCR仪、荧光显微镜、超净工作台、切片机、电泳仪、凝胶成像分析仪、冷冻离心机、电子天平(1/10 000g)、超低温冰箱、常规冰箱、灭菌锅、pH计、水浴锅、振荡器等
4.2 用具
可调移液器(0μL~20μL、20μL~200μL、200μL~1 000μL)、吸头、研钵、离心管(1.5mL、10mL)、PCR管(0.2 mL).量筒、烧杯、镊子等。
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