SN/T 3961-2014.Detection and identification of Canna yellow mottle virus.
1范围
SN/T 3961规定了美人蕉黄斑驳病毒检测的程序和方法。
SN/T 3961适用于进出境植物及其产品中美人蕉黄斑驳病毒的检测。
2原理
美人蕉黄斑驳病毒的基因组特征是制定本检疫鉴定方法的主要依据。美人蕉黄斑驳病毒的分类地位、寄主范围、病害症状、分布地区、传播途径、粒体形态、基因组等参见附录A。
3仪器设备、用具及试剂
3.1仪器设备
高速冷冻离心机、电子天平(1/1000 g)、实时荧光PCR、PCR仪、电泳仪、水平电泳槽、-20 °C低温、冰箱和-80℃超低温冰箱凝胶成像分析系统、pH计、微波炉、磁力搅拌器、恒温水浴锅、高压灭菌锅、超净工作台等。
3.2 用具
各种量程的可调移液器(1000uL、200μI、100μL、20μL、10μL、2μL)、PCR反应管、离心管(1.5 mL)、研钵等。
3..3试剂
巢式PCR试剂见附录B,实时荧光PCR试剂见附录C。
4检测与鉴定
4.1巢式PCR .
具体方法见附录B。
4.2实时荧光 PCR
具体方法见附录C。
5结果判定与记录
5.1 结果判定
——当巢式PCR、实时荧光PCR两种检测方法的检测结果均呈阳性时,则判定为检出CaYMV。
——当巢式PCR、实时荧光PCR两种检测方法的检测结果均呈阴性时,则判定为未检出CaYMV。
SN/T 3961-2014 美人蕉黄斑驳病毒的检疫鉴定方法
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