SN/T 3488-2013.Quarantine protocol for real-time PCR of Lawsona intracellularis.
1范围
SN/T 3488规定了猪劳森氏胞内菌荧光PCR检疫的技术要求。
SN/T 3488适用于猪劳森氏胞内菌的检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的,凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法
SN/T2123出人境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范
3仪器和试剂
3.1主要仪器
荧光定量PCR仪、高速冷冻离心机、旋涡混匀器、恒温循环水浴槽、低温冰箱、可调单头微量移液器(0.1 μL~2.5 μL、0.5 μL~10.0 μ1000 μL、20μL~200 μL)
4样品的采集、运输和保存
4.1 粪便样品的采集及保存
采集的样品最好是在动物使用抗菌药物之前,从直肠内采集的新鲜粪便。少量采集时,以灭菌的棉拭子从直肠深处蘸取粪便,并立即投人灭菌的试管内密封,或在试管内加人少量样品保存液(pH=7.4的磷酸缓冲液)后密封。采集较多量的粪便时,可将动物肛门周围消毒后,用带上胶手套的手伸入直肠内取粪便,也可用压舌板插人直肠,轻轻用力下压,刺激排粪.收集粪便。所收集的粪便装入灭菌的容器内,密封并贴上标签。样品采集后于4℃冷藏保存,然后立即运送至实验室(夏季不超过24 h,冬季不超过2d)。短时间不能送达的样品应于-20℃冷冻保存。样品运送时应保持冷冻状态,并防止倾倒。送达实验室后,若暂时不进行处理,则应冷冻(以-70℃或以下为宜)保存,不应反复冻融。
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