SN/T 3661-2013 口岸食源性疾病轮状病毒(A组)荧光PCR检测

SN/T 3661-2013.Detection for rotavirus ( group A ) of foodbrone disease by real-time fluorescence PCR at ports.
1范围
SN/T 3661规定了国境口岸食源性轮状病毒(A组)的荧光PCR快速检测方法,包括标本采集、运输与保存、处理、核酸提取与检测、结果分析以及相应的生物安全措施。
SN/T 3661适用于国境口岸出人境腹泻患者粪便样本、呕吐物和可疑食品的轮状病毒(A组)筛查检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 4789.1-2003食 品卫生微生物学检验总则
GB 19489实验室生 物安全通用要求
SN/T1720-2006出人境口岸轮状病毒感染监测规程
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1轮状病毒rotavirus
属于呼肠孤病毒科轮状病毒属,是引起哺乳动物类和鸟类腹泻的主要病原体。轮状病毒是双链RNA病毒,基因组分11个节段,轮状病毒有7个血清组(A-G),其中A、.B、C组与人类疾病有关,A组轮状病毒主要引起儿童腹泻,B组轮状病毒主要引起成人腹泻。
3.2荧光PCR fluorescence polymerase chain reaction
又称为实时PCR(real-time PCR),是在普通PCR的基础上利用荧光染料在激发光作用下所释放的荧光光能的变化来直接反映PCR扩增产物量变化的技术。本标准所采用的是Taq Man水解探针法,其原理是在常规RT-PCR(反转录聚合酶链式反应)的基础上,加入一条特异性的荧光探针,该探针为一段寡核苷酸,两端分别标记--个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,PCR扩增时,利用Taq酶的5'-3’外切酶活性将探针酶切水解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可以接收到荧光信号,实现了荧光信号的积累与PCR产物形成同步。

SN/T 3661-2013 口岸食源性疾病轮状病毒(A组)荧光PCR检测

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