HJ 755-2015.Water quality Determination of total coliforms and fecal coliforms Paper strip method.
1适用范围
HJ 755规定了测定水中总大肠菌群和粪大肠菌群的纸片快速法。
HJ 755适用于地表水、废水中总大肠菌群和粪大肠菌群的快速测定。
本方法的检出限为20MPN/L。
2术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
2.1 总大肠菌群 total coliforms
37°C培养,24h内能发酵乳糖产酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
2.2 粪大肠菌群 fecal coliforms
44.5°C培养,24h 内能发酵乳糖产酸产气的需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
2.3 最大可能数most probable number, MPN
微生物检验常用发酵法,又称稀释法,是一种利用统计学原理定量检测微生物浓度的方法。它根据不同稀释度一定体积样品中被检微生物存在与否的频率,查表求得样品中微生物的浓度,与直接报告菌落数的平板计数法不同,它最终报告的是样品中最有可能存在的目标微生物浓度,这个以最大可能存在的浓度,就被称为最大可能数(most probable number,缩写为MPN)。
3方法原理
按MPN法,将一定量的水样以无菌操作的方式接种到吸附有适量指示剂( 溴甲酚紫和2, 3,5-氯化三苯基四氮唑即TTC)以及乳糖等营养成分的无菌滤纸上,在特定的温度(37 °C或44.5 °C)培养24h,当细菌生长繁殖时,产酸使pH值降低,溴甲酚紫指示剂由紫色变黄色,同时,产气过程相应的脱氢酶在适宜的pH范围内,催化底物脱氢还原TTC形成红色的不溶性三苯甲瓒(TTF),即可在产酸后的黄色背景下显示.出红色斑点(或红晕)。通过上述指示剂的颜色变化就可对是否产酸产气作出判断,从而确定是否有总大肠菌群或粪大肠菌群存在,再通过查MPN表就可得出相应总大肠菌群或粪大肠菌群的浓度值。
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