GA/T 1160-2014.DNA extraction from drug plants-Silica method.
1范围
GA/T 1160规定了在法庭科学鉴定中采用二氧化硅法从毒品原植物(大麻.毒粟)中提取脱氧核糖核酸(DNA)的方法。
GA/T 1160适用于法庭科学鉴定中毒品原植物及其制品的DNA提取,也可用于普通植物的DNA提取。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注8期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682- -2008 分析实验室用水规格和试验方法
3术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1二氧化硅法silica method
一种以二氧化硅为固相吸附剂的基因组DNA提取方法.
4原理
十二烧基硫酸钠(sodium dodecyl sulate,SDS)是-种离子型表面活性剂,同时也是蛋白变性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋白,使核蛋白解聚。SDS和蛋白酶K(PK)共同作用促使蛋白变性、降解,达到裂解植物细胞释放出DNA的目的。在DNA纯化上,利用在低pH值和高浓度离液盐如异硫氰酸胍(GuSCN)存在的条件下,核酸能够与二氧化硅特异性的结合,在较高温度下核酸又能被高pH值、低盐浓度溶液从二氧化硅上洗脱下来的特性,获得高质量的植物DNA.
5器材
5.1眼科剪。
5.2眼科镊。
5.3 旋涡振荡器。
5.4 高速离心机(离心力≥13 000 g)。
5.5离心管。
5.6移液器。
5.7研钵、研杵等组织研磨器具。