SN/T 1376.1-2004.
1范围
SN/T 1376.1规定了牛传染性胸膜肺炎病原的分离与鉴定方法。本标准适用于牛传染性胸膜肺炎病原的分离与鉴定。规范性引用文件
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GB/T 6682——1992分析实验室用水规格和试验方法
3设备
3.1灭菌拭子。
3.2恒温培养箱。
3.3普通显微镜。
3.4穿刺针及注射器。
3.5净化工作台。
4培养基
4.1试验用培养基包括运输培养基,10%马血清肉汤培养基,10%马血清肉汤琼脂培养基、普通10%马血清肉汤琼脂培养基、葡萄糖生化培养基、精氨酸生化培养基和四氮唑盐生化培养基。
4.2培养基配制方法见附录A。
4.3实验用水应符合GB/T 6682--1992中的二级水标准。
6.1.2无污染样品:无菌抽取的胸腔液﹑关节滑液可直接接种。
6.2样品的接种
6.2.1取0.1 mL～0. 3 mL样品无菌接种于5管10%马血清肉汤培养基中,置37℃培养直至第10 d.6.2.2用无菌接种环钩取样品划线接种于10%马血清肉汤琼脂培养基上,每个样品共接种5个培养皿。每个培养皿用胶布或者蜡封口,置37℃培养直至第10 d。
6.3生长观察
6.3.1接种后第3d开始每天观察接种管及培养皿细菌生长情况直至第10 d。
6.3.2在10%马血清肉汤试管中,牛传染性胸膜肺炎病原的生长表现为:初期呈轻微混浊或白色点状或丝状,后逐渐均匀混浊,呈半透明稍带乳光,无菌膜或沉淀,也无颗粒悬浮。
6.3.3 在10%马血清肉汤琼脂培养基上,牛传染性胸膜肺炎病原的生长表现为:生长迟缓,为水滴状圆形略带灰色的微小菌落,中央有乳头状突起,呈“煎蛋”样外观,菌落直径约0.2 mm~2.0 mm。
6.4将可疑菌落或可疑肉汤培养物接种于普通10%马血清肉汤琼脂培养基,培养3 d~4 d,连传三代进行纯化,供病原鉴定用。
SN/T 1376.1-2004 牛传染性胸膜肺炎病原分离鉴定
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