SN/T 3506—2013.
1范围
SN/T 3506规定了布氏杆菌病荧光偏振试验技术要求。本标准适用于布氏杆菌病的检疫.筛查和监控。
规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489实验室生物安全通用要求
3生物安全措施
为了保护实验室人员的安全,应由经过生物安全培训的工作人员进行布氏杆菌病的检测,应当采取预防气溶胶感染的安全措施。所有废弃物应按照GB 19489中的有关规定处置。
4试验原理
溶液中的分子作随机转动。分子的大小是影响转动速率的主要因素,与其成反比关系。因而小分于较大分子转动得快。如果给分于标记上荧光色索,通过68.5°角度的转动时间即可通过测量水平和垂直的偏振光强度来确定。因而,大分子比转动快的小分子发射更多的偏振光。
诊断布氏杆菌病时,布氏杆菌光滑型LPS的小分子量片段OPS(平均22 kD),标记上异硫氰荧光素(FITC),用作抗原。然后加到待检血清中,若有抗休,与标记抗原结合后就会降低其转动速度,用荧光偏振仪器测定出偏振值,通过偏振值判定样品的阴、阳性。
5试剂和材料
5.1阳性对照:布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。
5.2阴性对照;布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。
5.325×浓缩的反应缓冲液;布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。
5.4︰结合物:标记有异硫氰荧光素的О型多糖(OPS)抗原,布氏杆菌病荧光偏振商品化试剂。
5.596孔黑色平底微量板。
5.6 除另有规定,本方法试验用水应使用符合GB/T6682规定的三级水。
6仪器和设备
SN/T 3506—2013 布氏杆菌病荧光偏振试验操作规程
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